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細胞實驗中累計的小竅門您了解多少?

發布時間: 2015-04-15  點擊次數: 2013次
  大家都知道經常在細胞實驗室做實驗,就算突然間想到的很多臨床經驗也很難總結在書本上,但是與整個實驗的成功卻密切相關,小編現在建立新貼,將自己關于細胞實驗的一些經驗分享。歡迎老師同學隨時補充并建議高手隨時添加內容,大家共享自己實驗中積累的小竅門。
  
  許多教科書推薦細胞解凍用37度水,本人發現溫度可以適當提高,39度也沒有問題,雖然只提高了2度,卻可以加速細胞解凍的時間。解凍后有提點挺重要,迅速用75%乙醇消毒凍存管管口和雙手,然后進入下一步工作,隨時別忘無菌操作。
  
  細胞凍存管一般有1.5-2ml左右體積,原則上可以存放1.5ml充滿均勻懸浮細胞的凍存液,一些人喜歡灌注1-1.5ml凍存液凍存,這實際上并不好。原因如下:凍存液凍存需要一段時間,如果這段時間凍存管傾斜,液體容易流到管口,很容易在后續的操作中造成污染。建議0.5-1ml之間即可。
  
  準備用實驗臺時,關掉紫外燈的同時,應打開鼓風機,如果操作太兩邊都有風機旋鈕,應該保持兩邊風機風速一致,而且應該大于100,以免飛蟲進入(當然不能吹滅酒精燈火苗)。再用75酒精蘸潔凈一次性紙巾擦試所有可以消毒的地方,尤其是工作面。
  
  當無菌操作臺經常有多人工作時,記住自己用時,盡量把各種實驗用物在紫外燈下消毒30-40分鐘,包括槍頭,移液器,廢液缸等容易忽略的物品。但是,不要讓胰酶和培養液處在紫外燈照時下!
  
  如果不是通過兩個圓孔進入手臂操作,而需要抬高操作臺前置玻璃擋板,一般不要超過15厘米,主要目的還是減少污染幾率。我們通過各界總結臨床經驗,將細胞培養發展的更好,感謝大家的傾力協作,如有任何經驗之談補充。
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