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elisa標準曲線檢測線性不佳如何處理?

發布時間: 2015-04-20  點擊次數: 560次

ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,復孔的變異系數應該小于20%。
只要它們平均OD值減去空白孔的OD值。就可以制作標準曲線。但是很多朋友遇到了標準曲線的線性關系不佳 ?這樣的問題,想知道如何解決處理?
我司技術總監給出問題答案:

Elisa檢測試劑盒標準曲線有可能加樣存在誤差,使得標準品不呈梯度。 
Elisa試劑盒標準曲線有可能標準品出現降解。應避免標準品反復凍融,或重新制備并稀釋標準品。 
Elisa試劑盒標準曲線有可能引物或探針不佳。重新設計更好的引物和探針 
Elisa試劑盒標準曲線有可能模板中存在抑制物,或模板濃度過高

朋友們可根據我司技術提出的幾點意見配合具體實驗。找出Elisa標準曲線檢測線性不佳的問題。zui后技術給出對于OD值落在標準曲線之外的情況:

如果樣品的OD值超過標準曲線的zui高值,在實驗前應該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品的zui終度應該是計算出的濃度乘以稀釋倍數。感謝大家使用上海勁馬實驗設備有限公司的試劑盒產品,我們竭誠為您提供的技術服務。 

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