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小鼠1-磷酸鞘氨醇ELISA試劑盒正確操作方法您學會了嗎?

發布時間: 2016-09-27  點擊次數: 432次

由BIM品牌提供的小鼠1-磷酸鞘氨醇ELISA試劑盒zui近受熱捧。本章小編將為您解析小鼠1-磷酸鞘氨醇ELISA試劑盒正確的操作方法。一直以來,我司小鼠1-磷酸鞘氨醇(S1P)ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強、重復性好的優點,在科研中深受廣大,科研工作者的喜愛。
首先我們來了解下實驗原理:
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被對稱性1-磷酸鞘氨醇(S1P)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性1-磷酸鞘氨醇(S1P)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

重點解析:
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

上海勁馬生物代理的BIM品牌酶聯免疫試劑盒擁有以下特點:
1、靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為1.0 nmol/L。
2、特異性:不與其它細胞因子反應。
3、重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

我們保證所有代理產品均為國外進口原裝,自產產品品質優良,用*的服務提供zui高質量、創新性的產品;
 

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