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進口ELISA試劑盒實驗測定有哪些基本模式?

發布時間: 2017-03-29  點擊次數: 570次

    在這十多個必經步驟中,洗板、洗滌就有著兩種不同的模式,說它簡單又覺得復雜,說它不易做又覺得基本步驟也就那么些,其實只要我們在過程中稍加注意,再多了解就能做出漂亮的實驗結果,那么它的一些基本模式都有哪些呢?

    
    1、將病原體的抗原在碳酸鹽緩沖液中4~C放置一個晚上包被,形成固相抗原,洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗原后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。    
    2、加入含待測抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時間后洗板;此時,待測抗體就會與固陽上特異抗原反應而吸附于固相上。
    3、加入酶標記的抗人IgG抗體,溫育一定時間后洗板;此時,在固相上即形成固相抗原—待測抗體—酶標二抗復合物。
    4、加入酶底物,溫育顯色測定。
     間接法測抗體在目前應用zui多的是丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗體(抗HIV)以及梅毒螺旋體抗體等的測定。從上述的測定模式可見,間接法測抗體,嚴格地講,所測定的僅為抗體的IgG類,不涉及IgM和IgA類,這是由酶標二抗體所決定的。
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