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本周焦點:血清,您所不知道的那些事兒

發布時間: 2017-05-11  點擊次數: 770次

   產品的保存方法與質量有著莫大的關系,有不少老師反映出在保存血清的時候會遇見“什么溫度zui合適”“怎樣避免沉淀物出現”等等問題。而實驗新手們在保存科研血清時也難免會遇見一些突發問題,那么我們要如何隨機應變呢?血清,您所不知道的那些事兒

 

1. 問:保存血清的方法是怎樣的呢?
   答:我們建議血清應保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

 

2. 問:如何解凍血清才不會使產品品質受損?
   答:我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。


3. 問:血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
   答:血清中沉淀物的出現有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。


4. 問:為什么要熱滅活科研血清?
   答:加熱可以滅活補體系統。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。


5. 問:有必要做熱滅活嗎?
   答:實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。 因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的品質!

                   
6. 問:為什么儲存在冰箱中的血清會出現沉淀?
   答:我們的胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的品質。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。

 

溫馨提示:
1. 解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2. 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
3. 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質。
4. 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
   

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