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ELISA實驗操作上您該這樣做

發布時間: 2019-08-13  點擊次數: 371次

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    ELISA實驗操作流程:

    固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加間斷液→比色→斷定效果。

    ELISA試劑盒操作較冗繁,在操作中應留神以下5個方面:

    1.在成批手工檢測中,還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時刻的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一起,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導致差錯效果或定量禁絕。

    2.洗刷是ELISA試劑盒操作進程中決議試驗成敗的一個要害進程。意圖是除去未結合的免疫反響物,間斷抗原抗體反響,除去標本中與反響無關的成分、游離的酶標物以及反響進程中吸附于固相載體上的非特異性物質??捎孟窗鍣C洗板或手工洗板,前者洗刷質量較好,各反響孔洗刷效果均一,批內、批間差異小,手工洗板應留神控制各孔洗刷效果,差異不宜太大。

    3.跟著病況的開展或由其他要素影響,某些抗體在機體內的含量發作大幅不堅定,因此有必要對標本進行預處理。直接法測定中,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

    4.加樣一般運用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免穿插污染。加酶結合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。

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