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關于血清滅活的幾個問題

發布時間: 2021-03-19  點擊次數: 308次

1、問:加到培養基中的血清必須滅活嗎?

答:不是必須的,看做什么實驗了。

2、問:四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎?

答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。

3、問:我要做滋養細胞培養,胎牛血清要滅活嗎?

答:進口的一般都已滅活,國產的不一定,還是滅活一下再用較安全。

4、問:我用病毒上清轉染細胞,培養用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影響轉染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響轉染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞,病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養基加病毒孵育幾小時,目的是什么?

答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據細胞的狀態決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活!這要根據實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。

5、問:(1)我買的是杭州四季青的新生牛血清,要滅活嗎?有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培養基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關系嗎?

答:關于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數實驗室將血清的熱滅活還是作為常規來執行,因為有兩個作用,第yi是滅活補體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響。

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