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elisa實驗前期的準備步驟

發布時間: 2012-12-31  點擊次數: 1314次

elisa檢測試劑盒實驗前期的準備步驟

 上海勁馬ELISA試劑盒供應商是中國的科研實驗生物試劑商。產品貨期快、質量品牌保障,歡迎各位新老客戶惠顧!ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。

實驗前期的準備步驟

 1仔細閱讀說明書
  2確定試劑盒在有效期內
  3按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)
  4標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存
  5準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
  6根據檢測標本數量確定所需試劑的量
  7按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
  DIY夾心法ELISA常見技術指南
  8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
  9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
  10標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
  11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
  12為了優化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
  13若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
  14當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.


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