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人唾液酸ELISA試劑盒操作步驟

發布時間: 2013-04-15  點擊次數: 876次

人唾液酸ELISA試劑盒操作步驟:
方法一 雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

2
. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37 孵育0.51小時,洗滌。

4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 1030分鐘。

5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以+、-號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

人唾液酸ELISA試劑盒注意事項:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在 4 ℃ 備用,如有特殊 原因需要周期收集標本,
將標本及時分裝后放在 -20 ℃ -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時, -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

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