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磷酸鹽緩沖液的配制方法

發布時間: 2013-06-14  點擊次數: 909次

  磷酸鹽緩沖(PhosphateBufferedSaline,簡稱PBS)的是常用于生物學研究的一個緩沖溶液。PBS可以為三種溶液的英文縮寫,分別是磷酸鹽緩沖溶液(phosphatebufferedsolution)、磷酸鹽緩沖鹽水(phosphatebufferedsaline)及磷酸鹽緩沖鈉(phosphatebufferedsodium),其配制方法不同,pH值不同,發揮的生物學作用亦不完全相同。
  
  磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法:
  
  稱取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調節溶液的pH值至7.4,zui后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘),保存存于室溫或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所說的濃度0.01M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na離子或K離子的濃度,Na離子和K離子只是用來調節滲透壓的。如果是用于免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100u/ml青霉素和鏈霉素之后再調PH、定容、滅菌消毒。
  
  PH7.67.47.27.0
  
  H2O1000100010001000
  
  NaCl8.58.58.58.5
  
  Na2HPO42.22.22.22.2
  
  NaH2PO40.10.20.30.4
  
  根據經驗來看,新鮮配置的PBS攪勻后其PH值約在7.2-7.4之間,可是在溫度的影響下,尤其在夏天,其電離常數發生了改變,在經過晝夜的時間后,PH值會明顯改變。所以做實驗的同學可要注意了,PH值可能會影響實驗結果,甚至可能導致陰性。所以務必記得這個時候和天氣,要加強實驗條件控制問題。每次使用前用試紙測一下過夜了的PBS,如果發生偏酸或偏堿,注意重新換新液。

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