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細胞消化過度問題的綜合解答

發布時間: 2014-03-26  點擊次數: 1201次

在常見實驗中我們發現,很多同學對細胞消化過度的問題產生一定的疑問,對此我們根據同學們所提問做出解答,關于細胞消化過度問題有著不同的闡述,下面一起來聽聽見解吧
同學的問題為:
我的細胞消化多度了,當時看到都嘩嘩的往下掉了?,F在養了兩天,有些飄起來,也有兩三個聚在一起,也有挺多帖璧的,但是感覺狀態還不好。由于科室沒有此細胞的凍存,所以得養好。大哥大姐,現在有有什么好的辦法補救下?
上海勁馬技術一的觀點為: 馬上用培養基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養瓶繼續培養??!狀態不好的細胞在培養的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉??! 胰酶過度消化造成細胞壁的損傷可以在細胞培養的過程中自己可以修復的! 
上海勁馬技術二的觀點為: 一般細胞消化到掉下來是沒問題的。如果針對你這種細胞來說是消過了的話,那接下來zui要緊的是立刻加入培養基終止胰酶對細胞的繼續作用,而不是用直接用胰酶吹打。加入培養基的量約為胰酶的1-2倍,然后離心去上清,培養基重懸,這時應該注意將細胞吹散,因為一般胰酶消化過度之后細胞容易聚集成團,不吹散的話會嚴重影響細胞狀態。吹打不宜過猛,20下左右,肉眼完全看不到顆粒狀懸浮后再吹幾下就行(當然你視力要好^^)。 另外,細胞狀態不好有的可以恢復,有的不能恢復。如果是可以恢復的你只要好好繼續培養就行;而不能恢復的話狀態不好的細胞以后會掛,換液除去漂浮的死細胞就行了,一般不用特意去除狀態不好的細胞。 
同學的問題為: 我zui近在培養肝星狀細胞,每次傳代時用胰酶消化,不到一兩分鐘,細胞就成片狀漂起。讓老師幫我傳代也是,細胞一起子就漂起來了,她說假如難以把握消化程度的話,讓我把細胞全部消化下來再離心。全部消化下來是什么意思?但是細胞成片狀漂起是不是細胞已經消化過度了呢?對細胞影響還是很大的吧,比如說影響貼壁和活力。請教各位高手。 
上海勁馬技術一的觀點為: 消化過度對細胞是有一定影響的。 可以采取加入小量血清抵抗胰酶的作用。 我的對待這種情況時具體操作如下; 加入少許血清,之后加入適量的 培養液,充分吹打成單細胞,之后轉移到滅菌的離心管中,封口膜封住,1000轉左右,離心5分鐘,小心的傾去上清,加入適量培養液,重新吹打成單細胞,之后正常操作 。本次解答您還滿意嗎,以上觀點均來自我司技術解本文細胞消化過度的問題屬于細胞培養文章,主要介紹細胞、消化過度、問題方面的知識,歡迎各位更加詳細的問題解答。

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