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關于Elisa實驗中動物體液采集方法分析

發布時間: 2014-12-08  點擊次數: 837次

Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。那么Elisa實驗中動物體液該如何采集呢,以下有上海勁馬生物分析,咨詢訂購我司產品。

一、血液的采集

常用的采血方法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動脈)采血、股動脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學、后肢小靜脈采血等。

二、尿液的采集

實驗動物的尿液常用代謝籠采集,也可通過其他裝置來采集。

(一)用代謝籠采集尿液

代謝籠用于收集實驗動物自然排出的尿液,是一種特別設計的為采集實驗動物各種排泄物的密封式飼養籠,有的代謝籠除可收集尿液外,又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內飼養的實驗動物,可通過其特殊裝置收集尿液。

(二)導尿法收集尿液

施行導尿術,較適宜于犬、猴等大動物。一般不需要麻醉,導尿時將實驗動物仰臥固定,用甘油潤滑導尿管。對雄性動物,操作員用一只手握住陰莖,另一只手將陰莖包皮向下,暴露龜頭,使尿道口張開,將導尿管緩慢插入,導尿管推進到尿道膜部時有抵抗感,此時注意動作輕柔,繼續向膀胱推進導尿管,即有尿液流出。雌性動物尿道外口在陰道前庭,導尿時于陰道前庭腹側將導尿管插入陰道外口,其后操作同雄性動物導尿術。

用導尿法導尿可采集到沒有污染的尿液。如果嚴格執行無菌操作,可收集到無菌尿液。

(三)輸尿管插管采集尿液

一般用于要求計量單位時間內實驗動物排尿量的實驗。剖腹后,將膀胱牽拉至腹腔外,暴露膀胱底兩側的輸尿管。在兩側輸尿管近膀胱處用線分別結扎,于輸尿管結扎處上方剪一小口,向腎臟方向分別插入充滿生理鹽水的插管,用線結扎固定插管,即可見尿液從插管滴出,可以收集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布遮蓋切口及膀胱。

三、骨髓的采集

1、大鼠、小鼠骨髓的采集

用頸椎脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液,沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查,可將胸骨或股骨剪斷,將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上,混勻后涂片涼干即可染色檢查。

2、大動物骨髓的采集

狗等大動物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚,然后估計好皮膚到骨髓的距離,把骨髓穿刺針的長度固定好。操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入,穿入固定后,輕輕左右旋轉將穿刺針鉆入,當穿刺針進入骨髓腔時常有落空感。狗骨髓的采集,一般采用髂骨穿刺。狗等大動物常用的骨髓穿刺點:胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點的中點。脛骨:穿刺部位是股骨內側、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺結束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發生氣胸。

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