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Elisa實驗過程中怎么驗證酶標板的可靠性

發布時間: 2014-12-30  點擊次數: 735次

Elisa實驗過程中怎么驗證酶標板的可靠性

浙一學院的王同學說:做了十多次的Elisa,能夠得到線性比較好的標準曲線,但是同樣濃度的標準品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經更換過,但是問題還是沒能解決,懷疑是酶標板的問題。求教各位高手,有什么方法可以快速驗證酶標板的可靠性。

小編分析:elisa本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時候更是差別很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%內吧,好的數據是3%內。首先要穩定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子,如果測定不一樣,就是包被問題或者保護劑的問題,但這兩個都是各個試劑盒的機密,看看文獻里別人怎么做的。其次每次實驗的標曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關。鑒定該ELISA體系是否可靠,zui關鍵的指標是加標回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。一般來說,國外廠商的ELISA試劑盒是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度,如果你的樣品濃度低于該檢測下限,則無法檢測到,這是很正常的現象,并不是非要每個樣品都要測出值才可以。我司主營Elisa試劑盒,公司人才濟濟。海外留學博士為您的實驗保駕護航。歡迎訂購我司試劑盒。

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